Определение плотности и количества клеток в клеточных культурах

Использование спектрофотометра для измерения абсорбционных свойств клеточных культур давно практикуется в биологических и медицинских лабораториях. Одним из таких приложений является определение количества клеток в среде (концентрация клеток), используя светопоглощающие (абсорбция) свойства клеточной культуры, как бактериальной, так и эукариотической. Клеточная культура обладает определенными оптическими свойствами, определяющими ее состояние, плотность и т.д. В случае бактериальной или эукариотической культуры клеток оптическая плотность, измереная при 600 нм, отражает концентрацию клеток в среде. По сути, в данном случае оптическую плотность культуры при 600 нм определяет эффект светорассеивания; светорассеивание, в свою очередь, прямо пропорционально концентрации клеток в среде.

Возможно также измерение светопоглощающих характеристик суспензии клеток при других значениях длины волны (260 нм, 280 нм и пр.) в зависимости от исследовательских задач.

На рисунке представлен спектр, полученый при измерении фотометрической абсорбции культуры бактериальных клеток E.coli
Оптическая плотность, измереная при 600 нм, отражает концентрацию клеток в питательной среде. В данном случае бактерии находятся на логарифмической стадии роста. Кювета с длиной оптического пути 10 мм, объем раствор - 1 мл
Спектр поглощения получен как результат автоматического измерения продолжительностью 100 мс
Определение концентрации клеток в среде можно проводить в кюветах объемом 200 мкл (длина оптического пути 1 мм) или 1000 мкл (длина оптического пути 10 мм)
Возможно построение отчетных бланков с графиками спектра поглощения и значениями поглощения при определенной длине волны для 12 образцов на одном бланке
Значения полного спектра поглощения могут быть конвертированы в формат MS Exel